Analyse qualitative de l'hépatite C

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Une analyse qualitative de la réaction en chaîne de la polymérase - La PCR pour l'hépatite C détermine la présence ou l'absence de VHC dans le corps. En laboratoire, la structure de l'ARN, incluant le virus, est étudiée. En cas de détection du virus C, il est nécessaire de suivre un traitement, car l’état négligé du foie aura des conséquences graves. Une PCR de haute qualité est également effectuée après la récupération pour confirmer l'absence d'anticorps. Assigné pour l'inspection de routine. Avec une faible concentration de l'agent responsable dans le sang, la PCR (qualitative) peut ne rien détecter du fait que le système de diagnostic a ses propres seuils de sensibilité. Dans le cas du stade initial de la maladie ou de la forme bénigne, les ultra-diagnostics par PCR sont effectués sur un équipement ultra-sensible.

Qu'est-ce que le virus à ARN?

Le terme ARN du virus de l'hépatite C (ou ARN du virus de l'hépatite C) désigne la maladie du foie elle-même. Le virus C se lie à la cellule saine du corps en pénétrant à l'intérieur. Au fil du temps, se répandant dans tout le corps, il suffit de pénétrer dans le sang. En conséquence, l'agent pathogène pénètre dans le foie, fusionne avec ses cellules et travaille dur. Les cellules hépatiques (hépatocytes) travaillent sous son influence, subissent des modifications et en meurent. Plus le virus C reste longtemps dans le foie, plus le nombre de cellules meurent. Au fil du temps, développez des maladies dangereuses qui entraînent une dégénérescence maligne et la mort.

L'infection du foie par ce type de virus peut ne pas se manifester de l'extérieur. Pendant de nombreuses années ou décennies, une personne infectée se sent complètement en bonne santé et seul un examen aléatoire révèle le plus souvent une pathologie. Lors du don de sang pour l'hépatite, une partie de la chaîne d'ARN (acide ribonucléique), qui fait partie du gène humain (ADN), est examinée. Les résultats des tests de laboratoire ne doivent pas être utilisés pour l'auto-traitement, car il ne s'agit que d'un indicateur. L'image exacte et le diagnostic ultérieur sont mieux déterminés par le médecin.

Une fois terminé: indications pour la recherche

Pour confirmer le VHC, une analyse PCR est effectuée (réaction en chaîne de la polymérase). Les études de PCR aident à trouver le matériel pathogène dans la structure de l'ARN et à prescrire un traitement efficace. Nommé dans les cas suivants:

  • détection de signes d'inflammation du foie;
  • études de dépistage pour la prévention;
  • examen des personnes en contact;
  • diagnostic d'hépatite d'origine mixte (détermination du principal agent pathogène);
  • déterminer le niveau d'activité de reproduction du virus dans la forme chronique;
  • cirrhose du foie;
  • déterminer l'efficacité du traitement prescrit.
Les études de PCR sont prescrites par un médecin afin de déterminer l'efficacité d'un traitement pour l'hépatite.

Il existe une analyse qualitative et quantitative de la PCR. La PCR quantitative montre le ratio de pourcentage d'ARN par le nombre de porteurs de virus dans le sang et qualitative indique la présence ou l'absence de virus. Un indicateur de qualité positif (présence d'ARN de l'hépatite C) nécessite également des recherches quantitatives. Un niveau élevé de concentration de l'agent responsable de l'hépatite C est associé au risque de transmission, c'est-à-dire d'infection de tiers. Un faible nombre est mieux traitable. La quantité de virus à ARN dans le sang n’est pas liée à l’intensité de la maladie. Une analyse par PCR est également effectuée dans le cas d'un traitement par interféron afin de prescrire la durée et la complexité du traitement.

Caractéristiques de l'analyse PCR de haute qualité pour l'hépatite C

Une analyse qualitative avec l'indice de réaction en chaîne de la polymérase est attribuée à tous les patients présentant des anticorps dans le sang pour l'hépatite C. Ceux qui ont été guéris et qui sont guéris doivent repasser le test. Il est recommandé de réussir le test de dépistage de l'hépatite B, puis, en cas de conclusion positive, et de l'hépatite D. En outre, la réaction analysée qualitativement doit être réalisée en association avec d'autres tests sanguins. Les analyses fourniront une image complète de la propagation virale.

D'après les résultats du test, seul un test positif pour l'hépatite C sera visible ou négatif, c'est-à-dire la présence ou l'absence d'un virus. Si la sortie est "détectée", le virus est et reste actif. La désignation "non détecté" indique l'absence de virus ou sa petite quantité. Avec cet indicateur, il convient de garder à l'esprit que la sensibilité analytique des systèmes de diagnostic est différente et que l'hépatite C à ARN peut encore être dans le sang, mais ne se manifeste pas dans l'analyse.

La méthode PCR particulièrement sensible ultra-hépatite C révèle même de faibles quantités. Une étude d'hybridation par fluorescence est utilisée, qui est plusieurs fois supérieure aux systèmes de PCR standard. La méthode est utilisée dans plusieurs cas:

  • formes présumées cachées de l'hépatite C;
  • Le diagnostic PCR n'a pas confirmé l'agent pathogène, mais il existe des anticorps.
  • en cas de récupération;
  • détecter une infection précoce.
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Analyse de décodage

Le décodage PCR du VHC affecte la décision finale lors du diagnostic, en particulier avec la méthode ultramétode. Le principal inconvénient de cette étude est le strict respect des conditions de stérilité pour l’échantillon et le matériel. Une légère déviation montre parfois des conclusions analytiques inexactes, complique le diagnostic et le traitement ultérieur. L'analyse de la PCR pour la détermination de l'ARN de l'hépatite ne donne pas toujours une image fiable de la maladie, des imprécisions sont parfois permises, et dans les deux sens.

Pour diagnostiquer le virus de l'hépatite, il est recommandé d'utiliser un examen complet.

Norme des indicateurs

L'absence d'anticorps JgM contre l'hépatite virale C dans les résultats de l'étude est considérée comme la norme dans l'analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. Dans le même temps, les résultats de l'analyse sérologique indiquent la présence d'anticorps anti-virus C, ce qui se situe également dans les limites de la normale. Une définition qualitative ne montre pas l’intensité de la maladie, elle révèle seulement l’agent responsable de l’hépatite C dans l’ARN. Cette analyse est répétée après le traitement pour confirmer la récupération réelle.

Déviations

Si des anticorps anti-JVM anti-JVM sont présents, cela indique une infection en développement. La maladie dans le même temps se développe de manière aiguë ou chronique, se manifestant à différents stades. Si une diminution du nombre d'anticorps est enregistrée, l'analyse indiquera que les résultats du traitement ont été obtenus pendant la récupération. Le diagnostic ne révèle que de très rares cas de faux positifs. On les trouve chez les femmes pendant la grossesse et chez les personnes atteintes d'autres maladies infectieuses.

Le coût des tests sanguins et de la PCR pour l'hépatite C

L'hépatite C est une pathologie inflammatoire dans laquelle les cellules du foie sont touchées. La maladie se développe à la suite de la pénétration du virus de l'hépatite C (HVC) dans le corps humain.

La forme de la maladie peut être aiguë ou chronique.

Le plus souvent, les symptômes de la forme aiguë de la pathologie sont absents chez la plupart des patients. Parfois, la maladie s'accompagne de sensations douloureuses dans l'abdomen, d'une diminution des performances, d'une fatigue accrue, d'une perte d'appétit, d'une teinte foncée de l'urine, d'une décoloration des matières fécales, d'une jaunissement de la peau et des muqueuses, de douleurs articulaires. Ces symptômes surviennent généralement 6 à 8 semaines après l'infection, mais peuvent apparaître après six mois.

Avec le développement de tels phénomènes, il est nécessaire de contacter une institution médicale et de procéder à un examen approfondi de tout l'organisme. Un test sanguin pour l'hépatite C est effectué dans le cadre d'un examen médical

Aujourd'hui, avec l'aide des techniques de diagnostic modernes, cette pathologie peut être identifiée au stade initial de développement, ce qui augmente considérablement les chances d'une guérison complète de la maladie.

Les groupes de personnes suivants sont requis pour le dépistage de l'hépatite C:

  • les femmes dans la période de porter un enfant;
  • personnes présentant des signes d'hépatite;
  • personnel médical;
  • donneurs potentiels d'organes et de sang;
  • toxicomanes, personnes infectées par le VIH, vie privée intime.

Liste des études requises

Quels tests devrais-je passer pour l'hépatite C? Pour diagnostiquer avec précision la maladie, identifier ses causes et déterminer l’état du parenchyme hépatique, les études suivantes sont nécessaires:

  • analyses générales d'urine et de sang;
  • analyse biochimique du sang;
  • Analyse PCR;
  • test sanguin pour la détection des anticorps anti-HVC;
  • un test sanguin pour les anticorps existants à ses propres cellules hépatiques;
  • biopsie du foie.

Le décodage des tests sanguins de dépistage de l'hépatite C est effectué par un spécialiste. Examinez chaque méthode de recherche plus en détail, et nous comprendrons quelle analyse de l’hépatite C est la plus précise.

Analyse générale

Lorsque vous effectuez une analyse sanguine générale de l’hépatite C, vous pouvez évaluer l’état du patient. Les modifications des paramètres sanguins ne sont pas perçues comme des symptômes spécifiques de l'hépatite. Cependant, avec cette maladie, il existe des troubles tels que:

  • diminution de la concentration en hémoglobine, plaquettes et leucocytes;
  • augmente le contenu des lymphocytes;
  • la coagulation du sang est violée;
  • la vitesse de sédimentation des érythrocytes (ESR) augmente.

L'analyse générale de l'urine permet de détecter dans sa composition l'urobéline - un pigment biliaire présent dans l'urine à la suite d'un dysfonctionnement du foie.

Analyse biochimique

L'analyse biochimique du sang dans l'hépatite C permet d'identifier des troubles tels que:

  • taux élevés d'enzymes hépatiques (alanine transaminase - ALT et aspartate aminotransférase - AST), qui pénètrent dans le sang lorsque les hépatocytes sont endommagés. Dans un état normal, ces indicateurs pour les hommes ne devraient pas dépasser 37 UI / l, pour les femmes - pas plus de 31 UI // l. Une augmentation de la concentration d'ALAT et d'AST dans l'hépatite C asymptomatique est souvent le seul symptôme de cette maladie. En outre, la phosphatase alcaline de glutamyl transpeptidase dans le sang augmente (normalement pas plus de 150 UI / l).
  • la teneur en bilirubine (générale et directe) dans le sang est dépassée. Si le taux de pigment jaune dans le sérum dépasse 27 à 34 µmol / l, il se produit une jaunisse (jusqu’à 80 µmol / l sous forme douce, 86 à 169 µmol / l - modérée, supérieure à 170 µmol / l - sous forme sévère).
  • Le niveau d'albumine est abaissé, la concentration de gamma globulines, au contraire, est augmentée. Les gamma globulines sont constituées d'immunoglobulines - des anticorps qui protègent l'organisme contre les substances pathogènes.
  • augmentation de la concentration de triglycérides dans le sang.

Test PCR

En utilisant la technique de PCR, il est possible de diagnostiquer l'agent causal de la maladie. Cette analyse permet de détecter un virus dans le sang, même si sa quantité est minimale. L’analyse PCR de l’hépatite C permet de déterminer l’infection existante dans le sang 5 jours après l’infection, c'est-à-dire bien avant l’apparition des anticorps.

Si le résultat d'un test sanguin de recherche de l'hépatite C par PCR est positif, cela indique la présence d'une infection active dans le corps. En utilisant cette méthode, vous pouvez effectuer une étude qualitative et quantitative de l'ARN de HVC.

Au cours de l'analyse qualitative de la PCR pour l'hépatite C, il est possible de détecter un virus existant dans le corps humain.

Cette procédure de diagnostic est effectuée si un anticorps anti-HVC est détecté dans le sang.

Le déchiffrement de l'analyse de l'hépatite C contient des informations selon lesquelles une infection a été détectée ou n'a pas été détectée dans le corps. Normalement, aucune substance pathologique ne se trouve dans le sang.

Si le test d'hépatite C est positif, cela signifie que l'agent pathogène se divise en permanence et infecte les cellules du foie.

Les résultats de cette analyse peuvent être peu fiables, il est possible dans les cas suivants:

  • biomatériau contaminé utilisé;
  • en présence d'héparine dans le sang;
  • en présence de substances chimiques ou protéiques (inhibiteurs) dans le biomatériau étudié affectant les éléments de la PCR.

L'analyse quantitative de l'hépatite C donne des informations sur la quantité de virus contenue dans le sang, c'est-à-dire détermine la charge virale. Par ce concept, on entend le volume d'ARN de HVC présent dans le sang (par exemple, en 1 ml). Dans l'interprétation de l'analyse quantitative de l'hépatite C, cette valeur est exprimée en équivalent numérique, mesurée en UI / ml.

Le sang pour la PCR pour l'hépatite C est prélevé avant les mesures thérapeutiques. Après l'analyse est effectuée à 1, 4, 12 et 24 semaines. L’étude de la semaine 12 est indicative et vise à évaluer l’efficacité des procédures médicales.

Si le test de dépistage de l'hépatite C pendant la grossesse est positif et que les valeurs de la charge virale sont dépassées, le risque de transmission d'agents pathogènes de la mère malade à l'enfant augmente plusieurs fois. De plus, avec des valeurs de charge virale élevées, la mise en œuvre de mesures thérapeutiques est difficile.

Selon la transcription des tests d'hépatite C, si la charge virale dépasse 800 000 UI / ml, elle est élevée. Si les chiffres sont inférieurs à 400 000 UI / ml, le niveau de charge virale est considéré comme faible.

L'analyse de l'hépatite C par PCR est considérée comme la plus précise et présente plusieurs avantages par rapport aux autres options de recherche, à savoir:

  • diagnostic direct de l'agent causal de la maladie. Lors de la réalisation d'études traditionnelles sont déterminées par la présence de marqueurs de protéines qui sont des déchets de pathogènes. Cela indique seulement que l'infection est présente dans le sang. Lors du test d'hépatite C par PCR, il est possible de déterminer le type d'agent pathogène présentant une pathologie dangereuse.
  • spécificité de la technique. Au cours de cette procédure, une région d'ADN unique est déterminée dans le biomatériau qui correspond à un seul type d'agent pathogène. Cela minimise la probabilité de faux résultats.
  • haute sensibilité. Lorsque vous effectuez une analyse PCR, vous pouvez détecter la quantité minimale de virus. Ceci est important si des substances pathogènes sous condition sont identifiées et ne constituent une menace que si leur niveau augmente.
  • Lors de l'utilisation de cette technique dans un échantillon du biomatériau, plusieurs agents pathogènes peuvent être détectés à la fois.
  • peut détecter des infections cachées. En outre, l’analyse permet de diagnostiquer des microorganismes pathogènes qui vivent à l’intérieur des cellules et présentent une grande variabilité antigénique.

Si les résultats du test sont positifs, des traces du virus sont trouvées dans le biomatériau, le réseau est infecté par le corps.

Une analyse PCR négative pour l'hépatite C signifie qu'il n'y a aucune trace d'infection dans le biomatériau.

Étude immunologique

Cette méthode vous permet d'identifier des anticorps dirigés contre tous les types de virus de l'hépatite, ainsi que des anticorps dirigés contre les cellules hépatiques de votre propre corps, dont l'apparition contribue au développement de l'hépatite auto-immune.

Les résultats obtenus au cours de l’étude sont pertinents pour une période de 3 mois. Vous devez alors redonner du sang pour le traitement de l’hépatite C.

Il est également possible d'effectuer une étude express à l'aide de bandelettes réactives spéciales. Cette analyse permet de déterminer les anticorps anti-virus C dans la composition du sang et de la salive.Cette procédure peut être effectuée indépendamment, à domicile.

Biopsie du foie

Pour effectuer une telle analyse, un élément du parenchyme hépatique est prélevé et un examen histologique du biomatériau obtenu est effectué. Cela vous permet d'évaluer l'état du corps: identifier les foyers inflammatoires, nécrotiques, le stade de la fibrose, etc.

Aujourd'hui, des tests remplaçant l'analyse histologique du parenchyme hépatique sont utilisés.

Pour évaluer le stade des lésions hépatiques et l'intensité du processus inflammatoire, des biomarqueurs sanguins veineux spécifiques sont utilisés. En utilisant FibroTest, vous pouvez évaluer le degré de croissance du tissu fibreux.

Lors de l'exécution d'Actitest, vous pouvez obtenir des informations sur l'intensité des processus pathologiques dans le parenchyme hépatique. Steatototesta peut diagnostiquer les tissus adipeux du foie et évaluer l’ampleur de ce processus. Fibromax comprend tous les tests ci-dessus et peut inclure d'autres études.

Préparation à l'étude

Quels tests sont effectués pour l'hépatite C et comment avons-nous découvert tel ou tel type de recherche. Il est également important de savoir comment se préparer à l'analyse.

Pour obtenir des résultats fiables, il est recommandé de respecter les exigences suivantes:

  • Les tests d’hépatite C doivent être pris le matin, à jeun. La dernière fois, les aliments doivent être consommés au moins 8 heures avant l'étude.
  • Le biomatériau peut être collecté le jour ou le soir. Dans ce cas, il est important qu’au moins 5 à 6 heures s'écoulent entre le dernier repas et l’analyse.
  • avant de donner du sang pour l'hépatite C, le thé, le café, le jus ou d'autres boissons doivent être jetés, seule l'eau est autorisée.
  • 48 heures avant l'étude, il est nécessaire d'exclure l'utilisation d'aliments gras, d'aliments frits et de boissons contenant de l'alcool.
  • pendant au moins une heure avant l'analyse, vous devez vous abstenir de fumer.
  • l'analyse ne doit pas être effectuée immédiatement après une échographie, un instrument, un examen aux rayons X, un massage ou une physiothérapie.
  • un jour avant la mise en œuvre de l'étude, il est nécessaire d'exclure l'utilisation de médicaments et l'activité physique intensive. Le stress émotionnel est également contre-indiqué.
  • Il est recommandé de passer 15 minutes avant de réaliser l’étude dans un état calme.

Effectuer la procédure de collecte de sang

Où se faire dépister pour l'hépatite C? Le prélèvement de biomatériau en vue de recherches ultérieures est effectué dans le laboratoire d’un établissement médical ou au domicile du patient.

Le sang d'une veine est prélevé comme suit:

  • à l'aide d'un garrot spécial enroulé autour de l'avant-bras du patient, le flux sanguin veineux est arrêté. Grâce à de telles manipulations, les veines seront remplies de sang et seront plus visibles, ce qui facilitera grandement le processus d'insertion de l'aiguille.
  • la zone de la peau où l'aiguille sera insérée est soigneusement traitée avec de l'alcool ou un liquide contenant de l'alcool.
  • Une aiguille est insérée doucement dans une veine, puis une éprouvette est spécifiquement conçue pour la collecte de sang.
  • Immédiatement après l'aiguille insérée dans la veine, le harnais de serrage est retiré du bras du patient.
  • après avoir recueilli le volume sanguin nécessaire à l'analyse, l'aiguille est retirée doucement de la veine.
  • un coton-tige stérile ou un tampon de gaze imbibé d'alcool doit être appliqué sur le site d'injection.
  • Pour éviter l'apparition d'un hématome, vous devez appuyer sur le tampon contre la zone d'insertion de l'aiguille, plier le bras au niveau de l'articulation du coude et le maintenir dans cette position pendant plusieurs minutes. De telles actions aideront également à arrêter le sang plus rapidement.

À condition que la technique d'administration interne soit bonne, cette procédure est absolument sans danger et ne provoque pas de sensations douloureuses.

Dans de rares cas, après la collecte de sang, les veines peuvent gonfler. Ce phénomène s'appelle "phlébite". Une compresse (pas chaude) aidera à résoudre le problème, elle doit être appliquée sur les zones enflées de la peau plusieurs fois par jour.

Certains problèmes peuvent également survenir en cas de trouble de la coagulation. Prendre de l'aspirine, de la warfarine et d'autres anticoagulants peut provoquer des saignements. C'est pourquoi, avant d'effectuer l'analyse, il est nécessaire de refuser de prendre tout médicament. Si le traitement ne peut pas être annulé, vous devez en informer le spécialiste.

Dates et prix

Combien de tests fait-on pour l'hépatite C? Les résultats d’une analyse sanguine de l’hépatite peuvent être prêts en quelques heures et en quelques jours (en règle générale, pas plus de 8 jours). La durée de préparation des résultats dépend du type de virus et de la méthode d'analyse choisie. Plus rapide est l'étude menée par la méthode PCR. Les résultats dans ce cas seront prêts dans quelques heures.

Combien coûte un test d'hépatite C? En fonction de la clinique et de la complexité de l'étude, le prix de la procédure peut varier de 400 à 11 000 roubles.

Vous devez savoir qu'il faut parfois plusieurs semaines pour former une quantité suffisante d'anticorps anti-HVC. Par conséquent, à un stade précoce du développement d'une pathologie, le résultat d'une étude peut être faux négatif.

En outre, il est possible d'obtenir des données peu fiables avec une analyse de qualité médiocre et une violation des conditions de transport du biomatériau obtenu (les échantillons doivent être livrés au laboratoire au plus tard 2 heures après le prélèvement sanguin).

Si le résultat de l'étude est positif, vous devez immédiatement contacter un médecin spécialisé dans les maladies infectieuses. Le spécialiste effectuera un examen supplémentaire et prescrira le traitement approprié.

Effectuer une analyse PCR de l'hépatite C et décoder les résultats

L’analyse PCR de l’hépatite C est une étude dont le but principal est d’identifier le matériel génétique de l’agent causal. L'analyse révèle l'agent causal de la maladie en utilisant la réaction en chaîne de la polymérase. Ce diagnostic a un degré élevé de précision, de spécificité pour détecter l’absence ou la présence d’une infection virale.

L'essence du diagnostic

Afin de réaliser une analyse PCR pour la détermination du virus de l'hépatite C d'un patient, on prélève du sang veineux contenant potentiellement l'ARN (acide ribonucléique) HCV du virus souhaité.

Le test PCR de recherche de l'hépatite C implique la procédure lorsque les éléments suivants sont ajoutés aux particules de sang du patient:

  • des amorces (courtes régions du gène nécessaire synthétisées artificiellement);
  • enzyme spéciale (ARN polymérase).

Après la collecte du matériel biologique est envoyé pour la recherche en laboratoire. Une partie du sang est nécessaire pour l'analyse PCR directe, la seconde est envoyée à l'étude par la méthode ELISA. L'enzyme est capable d'augmenter rapidement le nombre de matériel génétique du virus de l'agent pathogène. Dans un appareil spécial, plusieurs cycles de processus de chauffage et de refroidissement sont effectués. Au stade final, le matériel obtenu est comparé aux gènes du virus et une conclusion est formulée sur la présence ou l'absence de pathologie dans le corps du patient.

L'essence et la conduite de l'analyse PCR en laboratoire. Filmé par SiberianMedicalLaboratory.

Types de recherche

Il existe 3 types de diagnostics permettant de déterminer la présence du virus de l'hépatite C dans le corps humain:

  • génotypage;
  • la qualité;
  • quantitatif.

Méthode qualitative

Le diagnostic de l'hépatite C avec une méthode qualitative est applicable aux patients chez qui des anticorps anti-virus sont détectés lors du test sanguin. En cas de présence de la phase aiguë de l'ARN du VHC, de telles mesures de diagnostic permettent de déterminer la présence de la maladie dans les 1-2 semaines suivant l'infection. Pendant cette période, les anticorps anti-hépatite C ne peuvent pas encore être développés.

Méthode quantitative

Une méthode de diagnostic quantitatif est utilisée pour déterminer la concentration du virus dans les échantillons de sang. Un tel test de virémie (degré de concentration) permet de déterminer avec précision le nombre d'unités d'ARN viral. Le résultat final est exprimé dans le volume correspondant. Si nous parlons d'analyse quantitative, les indicateurs sont mesurés en 1 ml (1 cub. Cm).

Le paramètre de charge virale désigne le niveau de pouvoir infectieux de la maladie, c'est-à-dire qu'il reflète le degré "d'infectivité" du patient. En pratique, cela signifie que plus la concentration du virus dans le sang est élevée, plus le patient a de chances d'infecter d'autres personnes avec l'hépatite C. Une méthode de recherche quantitative permet également de déterminer la qualité et l'efficacité du traitement effectué.

Génotypage

Le génotypage révèle des mutations de l'agent causal de la maladie. Avant de prescrire un plan de traitement, le génotype du virus est déterminé: la qualité et la durée du traitement en dépendent. Par exemple, dans le traitement d'une maladie de type I, l'efficacité est de 60%, dans le cas de types II et III, d'environ 80%.

Avantages de l'analyse PCR pour l'hépatite

Les principaux avantages de la procédure sont les suivants:

  1. La possibilité d'un diagnostic précoce. L'analyse PCR permet de détecter la présence d'un virus dans les premiers stades de l'infection.
  2. Résultats d'erreur faibles. La ressource biologique étudiée vous permet de diagnostiquer une partie du matériel génétique caractéristique d’un seul type d’infection virale. Cette circonstance permet d'éviter de faux résultats de diagnostic.
  3. Haut degré de sensibilité. L'analyse PCR permet de détecter le virus à ARN en petites quantités, ce qui permet également de suivre les infections latentes dans le temps.

Indications pour

Le test de PCR pour l'hépatite C est nécessaire, si disponible:

  • avoir des contacts avec des personnes malades, ce qui pourrait entraîner une infection;
  • symptômes de cirrhose du foie (hypertrophie de la rate, modification anormale de la taille du foie, détection d'un plexus veineux sur l'abdomen sous la peau);
  • résultats positifs du test ELISA;
  • augmentation de l'activité de l'AST et de l'ALT (se manifestant dans l'analyse biochimique du sang);
  • la nécessité de contrôler la conduite du traitement antiviral;
  • la phase initiale du traitement pour la nécessité d'établir une charge virale;
  • mener la dernière étape de la thérapie pour éliminer les récidives possibles;
  • la présence de l'hépatite B chez le patient afin d'exclure l'apparition de lésions hépatiques mixtes.

Comment se préparer au don de sang pour les études PCR

La préparation à l'analyse PCR comprend les recommandations suivantes:

  • le sang est pris le matin;
  • l'analyse est effectuée à jeun, il est donc conseillé de faire une pause entre le dernier repas de 8 et 10 heures;
  • quelques jours avant le diagnostic doivent être exclus les aliments gras, épicés et frits, les boissons alcoolisées et le tabagisme;
  • Un jour avant l’analyse, il convient de s’abstenir de tout effort physique intense, d’exclure les cours au gymnase ou à la piscine.

Résultats d'analyse: normes et écarts

L’analyse elle-même n’est pas longue et le spécialiste hautement qualifié des hépatologues ou des maladies infectieuses décrypte les résultats de la PCR pour l’hépatite C. Sur la base des résultats de l'analyse, le patient est diagnostiqué.

Afin de déchiffrer correctement les résultats de l’enquête, les indicateurs suivants sont pris en compte:

  • analyse biochimique du sang;
  • données échographiques;
  • résultats de biopsie.

Interprétation de l'analyse quantitative

Lors de l'obtention des résultats de l'analyse quantitative du RAP, les indicateurs suivants sont pris en compte:

Tests de base pour l'hépatite C

L'hépatite virale C est un problème médical et social grave. Environ 180 millions de personnes dans le monde souffrent de cette maladie et 350 000 en meurent chaque année. Le long stade latent (asymptomatique) de l’hépatite C entraîne un diagnostic tardif. L’analyse de l’hépatite C est effectuée afin de diagnostiquer la maladie, le diagnostic différentiel permet, avec son aide, de déterminer la "maladie" transférée précédemment. L'étude est utilisée chez des patients présentant des symptômes de l'hépatite C, des taux élevés d'enzymes hépatiques, pour obtenir des informations sur des hépatites d'étiologie non précisées précédemment transférées, chez des patients à risque et des études de dépistage.

Le diagnostic de l'hépatite C se fait en 2 étapes:

Étape 1 Détermination de la présence dans le sérum d'anticorps anti-virus de l'hépatite C (anti-VHC).

Étape 2 En présence d'anti-VHC, un test de PCR sur l'hépatite C est effectué pour déterminer la présence d'ARN (acide ribonucléique) par PCR. Il permet d'identifier la phase du processus - «actif / inactif», pour résoudre le problème de la nécessité d'un traitement. On sait qu'environ 30% des personnes infectées par le virus de l'hépatite C se débarrassent de l'infection elles-mêmes, car elles possèdent un système immunitaire fort et n'ont pas besoin de traitement. L'utilisation de la PCR est déterminée par le génotype du virus. Différents génotypes répondent différemment au traitement.

Le degré d'atteinte hépatique de l'hépatite C est déterminé à l'aide d'une biopsie ou d'autres tests invasifs et non invasifs (par exemple, fibrotest). Le degré de stéatose hépatique est déterminé par steatotesta. Dans tous les cas, le diagnostic de l'hépatite C devrait être basé sur les données des enquêtes épidémiologiques, de la clinique de la maladie et des données de tests sanguins biochimiques.

Fig. 1. Effets graves de l'hépatite virale C - Ascite intense.

Test de l'hépatite C: anti-VHC

Les anticorps anti-VHC (anti-VHC) sont des marqueurs spécifiques de l'infection. Dans le corps d'un malade, des anticorps spécifiques sont produits contre les protéines du virus de l'hépatite C (antigènes) - des immunoglobulines de la classe IgM et IgG (IgM / IgG anti-HCV).

Après réception d’un résultat positif pour les anticorps anti-virus de l’hépatite C, un test de confirmation est effectué - détermination des anticorps totaux dirigés contre les protéines structurelles et non structurelles du virus. Les protéines d'enveloppe structurale des virus El et E2 sont produites par IgM anti-HCV, protéine de nucléocapside C-cor (IgG anti-HCV) et 7 protéines non-structurelles de NS - anti-HCV NS IgG.

Pour la détection des anticorps dirigés contre le virus de l'hépatite C, un test immuno-enzymatique (ELISA) est utilisé. Tests de confirmation - RIBA (immunoblot recombinant), moins souvent Inno-Lia (analyse de peptides synthétiques) sont utilisés pour confirmer (+) les résultats du test ELISA.

IgM anti-HCV

  • Les anticorps IgM anti-VHC apparaissent dans le sérum 4 à 6 semaines après l'infection et atteignent rapidement leur maximum. À la fin du processus aigu (après 5 à 6 mois), leur concentration diminue.
  • L'enregistrement à long terme de la présence d'IgM anti-HCV indique que l'hépatite C a acquis une évolution chronique.
  • L’augmentation du taux d’IgM au cours de la période d’hépatite C chronique suggère la réactivation du processus infectieux.
  • Le niveau d'immunoglobulines IgM vous permet d'évaluer l'efficacité du traitement.

IgG anti-HCV

Les anticorps IgG anti-VHC apparaissent dans le sérum du patient 11 à 12 semaines après l’infection. À 5-6 mois, le pic de concentration est enregistré. Prochains anticorps

rester à un niveau constant pendant toute la durée de la maladie dans la période aiguë et pendant la période de récupération.

Total des anticorps anti-virus de l'hépatite C

Les anticorps totaux dirigés contre le virus de l'hépatite C (anti-VHC total) sont utilisés pour diagnostiquer les cas "frais" de la maladie. Les anticorps totaux sont des anticorps dirigés contre la protéine C-cor de la nucléocapside (IgG anti-VHC) et 7 enzymes protéiques NS non structurales (IgG NS anti-VHC), anti-VHC NS3, anti-VHC NS4 et anti-VHC NS5.

Les anticorps totaux dirigés contre le virus de l'hépatite C apparaissent dans le sérum de la personne infectée 11 à 12 semaines après le début de l'infection, atteignent un pic au bout de 5 à 6 mois et restent à un niveau constant pendant toute la période de la maladie pendant la période aiguë et 5 à 9 ans après la période de rétablissement..

Chacun des types d’anticorps a une valeur diagnostique indépendante:

  • AntiHCVC (cor) sont les principaux indicateurs de contact avec l'hépatite C.
  • AntiHCVNS3 a détecté l'un des premiers processus de séroconversion (production d'anticorps en réponse à la présence du virus), indique la gravité du processus infectieux et indique une charge virale élevée. Avec leur aide, l'hépatite C héréditaire est déterminée chez les patients qui ne soupçonnent pas qu'ils ont une infection. La présence prolongée de NS3 anti-VHC dans le sérum indique un risque élevé de chronicité du processus.
  • AntiHCVNS4 suggère que le processus infectieux a un long cours. Le niveau des titres en anticorps peut être évalué en fonction de l’atteinte hépatique.
  • AntiHCVNS5 indique la présence d'ARN viral. Leur découverte dans la période aiguë est un précurseur de la chronicité du processus. Les titres élevés d'anticorps sur le fond du traitement suggèrent que le patient ne répond pas au traitement.
  • AntiHCVNS4 et antiHCVNS5. Ce type d'anticorps apparaît dans les derniers stades du développement de l'hépatite. Leur réduction indique la formation de rémission du processus infectieux. Après traitement, les titres de NS4 anti-VHC et de NS5 anti-VHC sont réduits en 8 à 10 ans. Ce type d'anticorps ne protège pas contre la réinfection.

Fig. 2. Macrodrug du foie. Cirrhose du foie dans l'hépatite C.

Analyse de décodage pour l'hépatite C

L'absence d'anticorps contre le virus de l'hépatite C est indiquée par le terme "norme". Cependant, cela ne signifie pas toujours l'absence de la maladie chez l'homme. Ainsi, l’absence d’anticorps dans le sang d’une personne infectée est enregistrée jusqu’à ce qu’ils apparaissent dans le sang - jusqu’à 6 mois à partir du moment de l’infection (12 semaines en moyenne). La période d'absence d'anticorps dans le sang d'une personne infectée s'appelle une "fenêtre sérologique". Les systèmes de test de 3ème génération (ELISA-3) ont une spécificité élevée (jusqu'à 99,7%). Environ 0,3% représentaient des résultats faussement positifs.

La présence d'anti-VHC indique une infection actuelle ou passée.

  • La détection des anticorps IgM et des anticorps anti-VHC Cor Cor, l'augmentation des titres d'anticorps IgG anti-VHC et les résultats de PCR (+) en présence de signes cliniques et biologiques d'hépatite aiguë indiquent une période aiguë de la maladie.
  • La détection des anticorps anti-IgM, anti-VHC Core, IgG NS-anti-HCV NS et (+) PCR entraîne la présence de signes cliniques et biologiques d'hépatite, indiquant une réactivation de l'hépatite C chronique.
  • La détection d'IgG anti-VHC Coré et d'IgG NS anti-VHC en l'absence de signes cliniques et de laboratoire d'hépatite et un résultat de PCR négatif indiquent que le patient a une hépatite chronique en phase latente.

Fig. 3. Macrodrug du foie. Cancer primitif du foie. Une des raisons du développement de l'oncologie est la cirrhose du foie, développée sur le fond de l'hépatite C chronique.

Analyse PCR pour l'hépatite C

La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) est le «gold standard» pour le diagnostic de l'hépatite virale C. La grande sensibilité du test permet de détecter le matériel génétique de virus (ARN), même s'il n'en existe que quelques-uns dans le matériel à l'étude. La PCR est capable de détecter les virus à ARN bien avant l’apparition d’anticorps dans le sérum, mais pas avant le 5ème jour à partir du moment de l’infection. Lorsqu'une maladie est détectée par PCR, les virus à ARN sont détectés non seulement dans le sérum, mais également dans les biopathes du foie.

  • La réaction en chaîne de la polymérase permet de déterminer la présence ou l'absence de virus de l'hépatite C dans le sang et de décider du début du traitement. On sait que jusqu'à 30% des patients se débarrassent eux-mêmes de l'infection, car ils possèdent un système immunitaire fort et ne nécessitent pas de traitement.
  • L'hépatite C PCR est utilisée pour contrôler l'efficacité du traitement.
  • La PCR est utilisée en l'absence d'anticorps dans le sang, mais en présence de fortes suspicions d'hépatite C (augmentation des taux de phosphatase alcaline, de bilirubine totale, de 2 fois l'excès d'enzymes hépatiques AST et ALT).
  • L'analyse PCR de l'hépatite C est utilisée pour contrôler la transmission intra-utérine des virus de l'hépatite.

Charge virale de l'hépatite C

En utilisant l'analyse PCR, il est possible de déterminer non seulement la présence d'ARN viral dans le sang - une analyse qualitative (détectée / non détectée), mais leur nombre - la charge virale (le nombre d'unités d'ARN viral dans 1 ml de sang). L'indicateur quantitatif PCR est utilisé pour contrôler l'efficacité du traitement de l'hépatite C.

Les méthodes utilisées pour la PCR ont une sensibilité différente. En Fédération de Russie, conformément aux recommandations méthodologiques de 2014, il est recommandé d'appliquer des méthodes présentant une sensibilité de 25 UI / ml ou moins. Selon les recommandations de l'Association européenne pour l'étude du foie de 2015, il est proposé d'appliquer des méthodes de détermination de l'ARN viral avec une sensibilité de 15 UI / ml ou moins.

En fonction de la sensibilité du système de test, le patient reçoit l'un ou l'autre des résultats de l'étude:

  • La sensibilité minimale de l'analyseur COBAS AMPLICOR est de 600 UI / ml (l'analyseur de l'ancienne génération).
  • La sensibilité minimale de l'analyseur HCB-TEST COBAS AMPLICOR est de 50 UI / ml, soit 100 copies par ml.
  • La sensibilité minimale de l’analyseur d’ARN VHC RealBest est de 15 UI / ml, soit 38 copies par ml (incluse dans le groupe des systèmes de test modernes). La spécificité de ces analyseurs est de 100%. Avec leur aide, les ARN des virus de l'hépatite C des sous-types 1a et 1b, 2a, 2b, 2c et 2i, 3, 4, 5a et 6 sont détectés.

S'il existe des copies d'ARN sous le seuil de sensibilité de cet analyseur, le patient reçoit la réponse «non détecté».

Fig. 4. Un exemple d'analyse PCR (test quantitatif). La charge virale est déterminée pour l'hépatite C.

Interprétation des résultats de l'analyse PCR de l'hépatite C

  • L'absence de virus à ARN indique l'absence d'infection.
  • L'absence d'ARN contre la présence d'anticorps dans le sang indique la disparition du virus de l'hépatite C sous l'influence du traitement ou de l'auto-guérison.
  • Dans certains cas, le virus est présent dans le sang, mais à des niveaux subliminaux, lorsque sa concentration n'est pas capturée par les analyseurs. Ces patients restent dangereux en termes d'infection.
  • La détection du virus à ARN pendant 6 mois consécutifs chez les patients atteints d'hépatite C aiguë suggère que la maladie a évolué de manière chronique.
  • La réduction de l'ARN viral au cours du traitement indique l'efficacité du traitement et inversement.

Fig. 5. Hépatose grasse. L’hépatite virale C est l’une des causes des dommages au foie.

Tests sanguins biochimiques de base pour l'hépatite C

Les analyses de sang biochimiques aident à établir l'état fonctionnel de nombreux organes et systèmes humains.

Enzymes hépatiques ALT et AST

Les enzymes hépatiques sont synthétisées par voie intracellulaire. Ils sont impliqués dans la synthèse des acides aminés. Un grand nombre d'entre eux se trouvent dans les cellules du foie, du cœur, des reins et des muscles squelettiques. Avec la défaite des organes (violation de l'intégrité des membranes cellulaires), les enzymes pénètrent dans le sang, où leur niveau s'élève. Des niveaux élevés d'enzymes sont enregistrés avec la défaite (lyse, destruction) des cellules du foie, l'infarctus du myocarde et d'autres maladies. Plus le taux de transaminases dans le sérum est élevé, plus nombreuses sont les cellules détruites. L'ALT prédomine dans les cellules du foie, l'AST dans les cellules du myocarde. Avec la destruction des cellules hépatiques, le niveau d'ALAT augmente de 1,5 à 2 fois. Avec la destruction des cellules du myocarde, le niveau d'AST augmente de 8 à 10 fois.

Lors du diagnostic d'une hépatite virale chronique, il faut faire attention au rapport AST / ALT (coefficient de Ritis). Un excès d'AST par rapport à l'ALT indique des dommages aux cellules hépatiques.

  • La norme AST pour les hommes va jusqu'à 41 unités / l, les femmes - jusqu'à 35 unités / l, les enfants de plus de 12 ans - jusqu'à 45 unités / l.
  • La norme d'ALT pour les hommes va jusqu'à 45 unités / l, les femmes - jusqu'à 34 unités / l, les enfants de 12 ans et plus - jusqu'à 39 unités / l.
  • Normalement (chez les personnes en bonne santé), le rapport AST / ALT est compris entre 0,91 et 1,75.

Bilirubine

La bilirubine est un produit de dégradation de l'hémoglobine. La bilirubine dans le sang se trouve sous forme indirecte (jusqu'à 96%) et directe (4%). Le processus de décomposition de cette substance se produit principalement dans les cellules du foie, où il est excrété par le corps avec la bile. Avec la destruction des cellules hépatiques, le taux de bilirubine dans le sérum augmente. Normalement, la teneur en bilirubine totale est inférieure à 3,4 - 21,0 µmol / L. À partir de 30–35 µmol / L, la bilirubine pénètre dans les tissus, ce qui entraîne un jaunissement de la peau et de la sclérotique.

Fig. 6. Lorsque l'hépatite C dans le sang augmente le niveau de bilirubine. La substance pénètre dans les tissus, ce qui explique pourquoi la peau et la sclérotique deviennent jaunâtres.

PCR pour le diagnostic de l'hépatite C

L'hépatite C est une inflammation des cellules du foie résultant d'une infection par le virus du VHC (hépatite C) causée par le contact avec le sang d'une personne infectée. Le code génétique du flavivirus HCV est porté par une molécule d'ARN (acide ribonuclénique) contenue dans la structure du virus. Ce phénomène menaçant le pronostic vital se distingue par le secret au stade initial de la pathologie. L'intervalle de temps entre l'infection et l'apparition des symptômes (réponse du système immunitaire) peut aller de un à six mois. En règle générale, la maladie prend une forme chronique et est difficile à guérir.

La médecine moderne vous permet de diagnostiquer une pathologie présentant des dommages mineurs au foie. Les méthodes de diagnostic les plus courantes et les plus efficaces incluent l’analyse par PCR. Considérez dans cet article ce qu’il en est et quels types existent.

Quelle est l'étude

L'analyse PCR de l'hépatite C est un examen de laboratoire qui détecte le flavirus, le matériel génétique de l'acide ribonucléélique (ARN). Il détermine le nombre de molécules d'ARN dans le sang, la qualité du matériel biologique, le type génétique du flavirus du VHC.

La méthode PCR de l'hépatite C permet de détecter la quantité minimale de flavirus avant la formation d'anticorps, généralement peu de temps après l'infection.

L’étude est souvent appelée analyse d’ARN car elle détecte des particules d’acide ribonucléique d’une taille de 30 à 60 nm contenues dans un flavavirus.

L'étude est conduite comme suit: à jeun, le patient donne du sang provenant d'une veine, qui est ensuite testé par différentes méthodes:

  • La PCR en temps réel est réalisée de manière automatisée et fermée avec une limite inférieure de détection des virus à ARN de 15 UI / ml;
  • COBAS AMPLICOR avec une sensibilité de 50-100 UI / ml.

Plus le seuil de sensibilité d'une technique de diagnostic est élevé, plus les chances de détecter la plus faible teneur en virus dans le matériel biologique étudié sont grandes.

Quels types d'analyse sont utilisés

Une analyse qui a été utilisée avec succès pendant plusieurs décennies s'appelle l'hépatite PCR et elle peut être détectée assez facilement et rapidement. En médecine, il existe deux méthodes de réaction, fondamentalement différentes:

  • méthode qualitative révèle la présence dans le matériel biologique de la source génétique d’un virus particulier;
  • l'analyse quantitative mesure le nombre de matières génétiques, ce qui permet de déterminer le stade de la pathologie ou d'évaluer l'efficacité du cours thérapeutique;
  • le génotypage détermine le type de virus présent dans le corps.

En général, une analyse de sang aide à identifier la nature de la virémie et le type génétique de l'agent pathogène. En règle générale, l'étude est réalisée 1 fois en fonction du degré de sensibilité du système de diagnostic. Si nécessaire, les tests sont à nouveau effectués avec un réactif ultrasensible.

PCR de haute qualité

Qu'est-ce que l'ARN PCR de haute qualité pour l'hépatite C? L'essence de la réaction réside dans la présence de la séquence d'ARN de l'hépatite et la réaction n'est possible qu'en présence de protéines virales d'étymologie similaire dans le test ELISA. Au cours du processus de comparaison, la charge et les éventuels dommages au foie sont détectés.

Une caractéristique distinctive de cette méthode est la capacité de détecter même la présence d'un gène séparé.

Il convient de noter qu’après avoir reçu les résultats d’un test PCR et ELISA, le patient a besoin d’un traitement approprié, quel que soit le résultat du dosage immunoenzymatique final. Positif indique une infection et PCR négatif, un nombre réduit de particules virales par rapport au niveau de sensibilité.

Plusieurs conditions affectent la production d’une PCR et d’un test ELISA négatifs:

  • le manque de conditions appropriées pour la collecte de matériel;
  • l'analyse résultante contient une contamination;
  • en cas d'injection précoce d'héparine au patient.

De la part du patient, il n’est pas nécessaire de respecter certaines règles pour le prélèvement de sang en vue d’une analyse PCR; dans ce cas, la qualité de cette analyse dépend du professionnel de la santé effectuant la procédure. La possibilité d’établir la présence de la maladie (en particulier dans la forme aiguë) apparaît quelques semaines après l’infection.

Analyse quantitative

Un test quantitatif est recommandé pour détecter la charge virale immédiatement avant la formation d'un traitement supplémentaire et la réaction du corps. Le processus de prélèvement sanguin est effectué de la même manière qu'avec la PCR et le test ELISA de haute qualité, la seule condition est l'absence de possibilité de fumer du patient avant la procédure.

En ce qui concerne les caractéristiques des données obtenues à la suite de l’étude, l’augmentation de la charge est caractérisée par des indicateurs allant de 800 000 UI / ml à faible - 400 000 UI / ml. La présence d'un virus dans le corps du patient est indiquée par la PCR pour l'hépatite n'est pas un test qualitatif négatif.

Ce type de recherche permet de déterminer à quel point le patient est dangereux pour son entourage. Par exemple, l'identification d'un niveau élevé indique une augmentation du pouvoir infectieux du patient. En outre, les résultats de l'analyse aident à formuler le traitement le plus efficace et à déterminer dans quelle mesure le traitement existant est considéré comme efficace.

La réponse rapide et négative des tests indique le succès de la technique choisie, et la lente, la nécessité d'ajustements et l'utilisation de traitements divers.

Le processus de prise de la procédure d'analyse dépend du jour spécifique de la maladie. La première détermination est effectuée le premier jour après l'admission du patient à l'hôpital, puis la procédure est répétée 4, 12 et 24 semaines après la prise du médicament.

Ainsi, une analyse quantitative montre quel traitement est le plus efficace, la durée de la thérapie disponible et le danger du patient par rapport aux autres personnes.

Génotypage

Lors de l’étude de l’analyse des matériaux, il est important de déterminer la précision du génotype du virus. Il existe actuellement 11 variétés du virus de l'hépatite C, qui incluent certaines sous-espèces.

Toutes ces espèces répondent différemment à différents traitements et les différentes espèces sont absolument résistantes à de nombreux médicaments.

Le génotype permet de déterminer et de montrer l'état du foie. Il n’est pas rare que les résultats soient enregistrés «non typés», ce qui signifie que le virus présent dans le sang du patient n’est pas détecté par ce système de test. Ceci peut être détecté si un génotype particulier ne correspond pas à cette zone. Dans une telle situation, l’analyse est répétée et un système plus sensible est utilisé pour étudier le matériel.

Méthode ultra sensible

La méthode ultrasensible est nécessaire dans certains cas où le diagnostic de l'hépatite ne peut pas être effectué par d'autres méthodes, et quand procéder à une analyse est déterminé par le médecin traitant:

  • en cas de suspicion de présence du virus de l'hépatite C chez les patients présentant un type latent de la maladie;
  • la présence d'anticorps contre le virus de l'hépatite C, non confirmée par le diagnostic PCR;
  • afin de déterminer la qualité de l'efficacité de la méthode de traitement choisie et de confirmer l'élimination de la maladie.

La sensibilité de cette méthode est beaucoup plus élevée que celles couramment utilisées, cependant, cette méthode n’exclut pas l’obtention de résultats faux, tant positifs que négatifs. Dans une telle situation, il est important de contrôler la qualité de la procédure et la possibilité de contamination du matériau lui-même.

Explication de l'analyse PCR

Le décodage de l'analyse est effectué sur la base des matériaux présentés, tandis que les résultats d'études de laboratoire incluent certaines données décrites ci-dessus.

Le décodage peut inclure une réaction en chaîne de la polymérase PCR positive et un test ELISA négatif, ce qui signifie que le patient ne présente aucun signe d'hépatite C dans le sang, mais il a déjà transféré la forme aiguë de la maladie. En règle générale, lors du diagnostic, les spécialistes ont recours à des indicateurs de test PCR.

En résumant tout ce qui précède, on peut conclure qu’au cours de l’analyse, il est important de respecter toutes les règles et recommandations afin que les résultats obtenus soient aussi précis que possible et que, sur la base des données obtenues, il soit possible de déterminer l’efficacité du traitement utilisé et les chances supplémentaires de rétablissement.

Analyse PCR pour l'hépatite C

Pour le diagnostic de "l'hépatite virale chronique C (CVHS)", un examen complet de la personne est nécessaire, qui comprend des études cliniques, de laboratoire et instrumentales. Du point de vue du diagnostic, la méthode PCR - amplification en chaîne par la polymérase est importante.

Que montre cette analyse et pourquoi est-ce nécessaire?

Cette méthode de laboratoire détecte l'ARN du virus de l'hépatite C dans le sang humain. En association avec le test ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) pour les anticorps dirigés contre le virus, la PCR permet de diagnostiquer la CVHC et le génotype de son agent pathogène. Cette recherche est l’une des méthodes les plus récentes de diagnostic en laboratoire. Sa fiabilité chez CVHS dépasse 97%, ce qui est considéré comme un très bon indicateur pour la recherche.

Il existe trois dosages de PCR sanguine pour CVHC: le génotypage qualitatif, quantitatif et viral. La première étude (analyse qualitative) d’un virus le détecte dans le sang et n’est donc utilisée que pour le diagnostic.

La deuxième étude (quantitative) détermine le degré de charge virale sur le corps et est donc utilisée pour surveiller l'efficacité du traitement.

La troisième PCR (génotypage) clarifie le diagnostic en établissant le génotype du virus, ce qui est très important pour la désignation d'un traitement antiviral correct.

L'essence de la technique de réaction en chaîne par polymérase consiste à utiliser des enzymes qui multiplient le matériel génétique de l'agent pathogène dans le biomatériau. Au cours de cette réplication, le tube contenant le sang est chauffé plusieurs fois et refroidi à la température requise pour accélérer la réaction enzymatique. À la suite de ces manipulations, la quantité de génome viral augmente plusieurs fois, ce qui permet de le détecter même avec une quantité minimale.

Le diagnostic PCR présente de nombreux avantages par rapport aux autres tests de laboratoire:

  • haute sensibilité - 97-98%;
  • spécificité analytique garantie (révèle exactement l'agent pathogène que vous voulez trouver, et non la souche qui lui est liée);
  • rapidité de réalisation (il ne faut pas plus de 2 jours pour obtenir une conclusion).

Trois types de tests PCR

Une analyse PCR de haute qualité est attribuée à tous les patients chez lesquels une analyse ELISA a détecté des anticorps anti-virus HVGS. Après avoir effectué une PCR de haute qualité, deux options de réponse peuvent être obtenues: "ARN détecté" ou "ARN non détecté". Pour détecter la quantité minimale de virus dans le sang, il est nécessaire de disposer de systèmes de test d’une sensibilité d’au moins 50 UI / ml. Si la concentration du virus dans le sang du patient est inférieure à ce que le diagnostic peut déterminer, le résultat de l’étude peut être un faux négatif. Pour éviter une telle erreur de diagnostic, les laboratoires effectuant des diagnostics PCR devraient disposer de systèmes de test hautement sensibles. Dans le laboratoire «Invitro», par exemple, des tests avec une sensibilité de 15 UI / ml sont utilisés. Les travailleurs de laboratoire sont tenus de fournir des informations sur la sensibilité des tests aux patients et aux médecins à leur première demande.

L'analyse quantitative de la PCR détermine le degré de virémie, c'est-à-dire la concentration de l'agent pathogène dans le sang, la charge virale. Le résultat de cette étude, contrairement à la PCR de haute qualité, est exprimé en chiffres, par exemple, 2x10 * 6 UI / ml, ce qui correspond à 2 millions d'unités internationales dans 1 ml de sang. Certains laboratoires utilisent un autre indicateur - le nombre de copies / ml. Ces deux indicateurs sont faciles à convertir: 1 unité internationale équivaut à 4 copies d'ARN. Ainsi, 2 × 10 * 6 UI / ml signifieront que 8 × 10 * 6 copies d’ARN viral dans 1 ml, c.-à-d. 8 millions d'exemplaires dans 1 ml de sang.

Le génotypage est la définition de l'un des six génotypes d'un virus. Le tableau clinique, le taux de développement de complications hépatiques et le pronostic pour la vie future du patient dépendent du génotype de l’agent en cause. Le génotype du virus est déjà très important au stade du diagnostic, car la combinaison de médicaments et la durée de l’évolution thérapeutique à attribuer au patient dépendent de sa détermination correcte.

Cependant, même cette recherche de laboratoire apparemment «parfaite» a ses inconvénients:

  • L'étude reproduit le matériel génétique de tous les agents pathogènes, même non vivants, ce qui peut fausser les résultats. Par conséquent, afin de contrôler l'efficacité à l'aide de la PCR, une réanalyse est effectuée au plus tôt 2 mois après la précédente, afin que les virus morts puissent "quitter" le patient.
  • une partie du génome viral, déterminée à l'aide de systèmes de test, peut théoriquement être présente dans d'autres virus ou micro-organismes, de sorte qu'il est possible que la réponse soit faussement positive;
  • les virus mutent rapidement. Parfois, la vitesse et l'étendue de la mutation du virus sont si élevées que le système de test cesse de capturer son génome. En conséquence, un résultat faux négatif est possible.

Pour pallier ces lacunes, les fabricants de systèmes de test de laboratoire pour le diagnostic PCR effectuent en permanence leurs tests, y compris les réactions croisées et la sensibilité à un génotype particulier du virus.

Comment faire un test PCR pour l'hépatite C?

Pour que la conclusion d'un examen de PCR soit fiable, il est nécessaire de suivre strictement les règles de préparation:

  • les recherches sont menées à jeun (le glucose, les matières grasses, les minéraux pénétrant dans le sang par les aliments peuvent affecter la vitesse et la qualité de la réaction enzymatique);
  • l'écart entre le dernier repas et le prélèvement de sang aux fins d'analyse devrait être d'au moins 8 heures;
  • à la veille de l’étude, il est interdit de boire de l’alcool et de consommer des aliments gras dont la période d’élimination est longue;
  • un jour avant d'aller au laboratoire devrait éviter un stress physique et émotionnel fort;
  • jusqu’au moment du prélèvement sanguin n’est pas recommandé de fumer.

Afin d'éviter de fausses conclusions, le prétendu patient doit se rendre au laboratoire un peu plus tôt que le sang ne sera prélevé. Il faut 15 à 20 minutes à une personne pour reprendre son souffle et se calmer. L'adrénaline, présente dans le sang après une promenade rapide, peut affecter le résultat de l'examen.

Si le patient référé pour analyse prend des médicaments, il doit en informer le médecin. Il est possible que certains d'entre eux devront être refusés pendant un certain temps (si possible).

Le résultat de l'analyse de la PCR pour l'hépatite C

Décodage des résultats impliqués chez le médecin du laboratoire qui a effectué l'analyse. Le décodage est la définition de la déviation du résultat obtenu de la norme. Le taux d'indicateurs est établi directement par le fabricant du système de test utilisé par le laboratoire pour le diagnostic. Il n’est donc pas surprenant que, dans certains laboratoires, la charge virale soit déterminée en UI / ml et, dans d’autres, en copies / ml.

Ayant reçu la conclusion, il est nécessaire de pouvoir l’interpréter correctement. Le traitement des résultats de l'étude doit être effectué par le médecin traitant du patient atteint d'hépatite C. Ce n'est qu'après un examen objectif, instrumental et en laboratoire du patient, qu'il peut obtenir suffisamment de données pour permettre une interprétation correcte des résultats de PCR obtenus.

L'évaluation de l'analyse qualitative, en règle générale, ne pose pas de difficultés, même chez les patients. Le résultat, il ne peut y en avoir qu'un: "détecté" ou "non détecté". Dans ce cas, le second est la norme.

Les indicateurs de l'analyse quantitative sont plus difficiles à interpréter. Il montre le degré de charge virale du patient. Même parmi les hépatologues, il n'y a pas de consensus sur la manière de traiter la virémie détectée. La plupart des médecins ont tendance à croire qu’une charge élevée de plus de 8 × 10 * 5 UI / ml devrait être envisagée. Une charge supérieure à 1 × 10 * 7 UI / ml est considérée comme très élevée, tandis qu'une charge faible est inférieure à 4 × 10 * 5 UI / ml.

Le degré de charge virale suggère la virulence (agressivité) du virus: plus sa quantité dans le sang est importante, plus les complications du foie peuvent se développer rapidement. Une concentration élevée du virus dans le sang d'une femme enceinte augmente le risque de pénétration du virus à travers la barrière hémato-placentaire jusqu'au fœtus. La virémie affecte également l'efficacité du traitement: avec un nombre peu élevé, l'efficacité du traitement est supérieure à celle d'un traitement élevé.

Pour avoir confiance en la précision de l'analyse de la PCR pour l'hépatite C, il est nécessaire de ne privilégier que les laboratoires qui ont bien fonctionné. La politique de tarification dans ce cas ne devrait pas jouer un rôle primordial.


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